苯唑西林钠细菌内毒素检查法的建立

目的: 建立苯唑西林钠细菌内毒素检查法.方法: 参照中国药典2000年版二部附录XIE 细菌内毒素检查法和附录XIXF 细菌内毒素检查法应用指导原则,采用凝胶法进行干扰试验.结果: 本品的最大不干扰浓度为2.5mg*ml-1.结论: 本品适用于细菌内毒素检查法.     

对无菌试验培养基灵敏度试验法准确性的初步研究

目的：研究《中国生物制品规程》(2000年版)(简称《规程》)中需氧菌和厌氧菌无菌试验培养基灵敏度试验法及真菌无菌试验培养基灵敏度试验法的准确性。方法：按照《规程》中需氧菌和厌氧菌无菌试验培养基灵敏度试验法及真菌无菌试验培养基灵敏度试验法，同时采用平皿[乙型溶血性链球菌采用血琼脂平皿，短芽孢杆菌采用营养琼脂平皿，生孢子梭状芽孢杆菌(简称生孢梭菌)采用硫乙醇酸盐软固体琼脂平皿(厌氧培养)，白色念珠菌采用真菌培养基琼脂平皿]计数法，在相同稀释度及培养温度条件下平行进行1mL菌液的菌落形成单位(Colony Forming Units，CFU)计数。将菌液稀释至与标准比浊管相同之浓度，然后作10倍系列稀释。将稀释度为10^-6～10^-8的短芽孢杆菌、10^-6～10^-8的生孢梭菌，10^-7～10^-9的乙型溶血性链球菌菌液各1mL，分别接种到9mL硫乙醇酸盐培养基中；将稀释度为10^-5～10^-7的白色念珠菌菌液各1mL，分别接种到9mL真菌培养基。每个稀释度至少接种3管，用未接种培养基作对照。将接种短芽孢杆菌的培养基，置35℃培养5d，接种生孢梭菌或乙型溶血性链球菌的培养基，置35℃培养3d，接种白色念珠菌的培养基，置25℃培养5d，同时重复3次试验，记录结果。用每个菌种，按照需氧菌和厌氧菌无菌试验培养基灵敏度试验法及真菌无菌试验培养基灵敏度试验法重复进行3次灵敏度试验。结果：按照《规程》中需氧菌和厌氧菌无菌试验培养基灵敏度试验法及真菌无菌试验培养基灵敏度试验法，同一种培养基，用同一质控菌种重复3次灵敏度试验，结果往往不同，尤其是用乙型溶血性链球菌进行质控时，更为明显。平皿CFU计数与比浊菌数常有显著差异。结论：《规程》中需氧菌和厌氧菌无菌试验培养基灵敏度试验法及真菌无菌试验培养基灵敏度试验法准确性欠佳。     

两性霉素B脂质体粒度测定方法研究

目的：建立两性霉素B脂质体粒度检测方法，通过测定一组性质不同的样品，找出最佳测定方法。方法：用计算机的图像一数字处理技术结合扫描电镜、透射电镜和激光光散射粒度测定仪分别测定两性霉素B脂质体的粒度。结果：电镜法测定两性霉素B脂质体的粒度为20—100nln，平均粒径为55—75nm；激光光散射法测定两性霉素B脂质体的粒度为30—200nm，平均粒径为50—180nm。结论：激光光散射法能较好反映两性霉素B脂质体在使用时的真实粒度，且方法快速、简便，是一种较好的两性霉素B脂质体粒度测定方法。     

薄层扫描法测定维参锌胶囊中人参皂苷Re的含量

目的 用薄层扫描法测定维参锌胶囊中人参皂苷Re的含量。方法 以氯仿-甲醇-水(65:35:10)为展开剂,双波长反射法锯齿扫描:λs=525nm,λR=700nm。结果 平均回收率为98.80%,RSD =0.67%(n =5)。结论 该方法简便、准确、重现好。     

刺五加提取物大孔树脂精制试验

目的　为了提高异嗪皮啶活性成分含量 ,采用大孔树脂 ,考察刺五加提取物精制过程。方法　采用大孔树脂为材料 ,吸附刺五加提取物 ,70 %乙醇溶液洗脱提取物 ;用HPLC法测定精制前后异嗪皮啶含量。结果　刺五加提取物经过大孔树脂精制后 ,其活性成分之一异嗪皮啶含量提高了 5倍。结论　大孔树脂在中药提纯过程中有重要应用价值     

二烯丙基二硫诱导人白血病HL-60细胞分化差异表达cDNA文库的构建

目的　应用抑制性消减杂交技术构建二烯丙基二硫(diallyldisulfide ,DADS)诱导人白血病细胞分化的消减杂交cDNA文库 ,以期克隆DADS诱导人白血病HL 6 0细胞分化的相关基因。方法　用DADS诱导人白血病HL 6 0细胞分化 ,提取polyA+ RNA ,反转录合成cDNA ,消化成短片段后分成两组 ,分别与两种不同的接头连接 ,再与未处理的白血病细胞cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR扩增 ,将PCR产物与pGEM T线性载体连接 ,转化大肠杆菌进行文库扩增 ,随机挑取克隆进行酶切鉴定。结果　成功地构建了具有高消减效率的DADS诱导白血病细胞分化的cDNA文库 ,随机挑取消 2 0 0个克隆制备质粒并酶切分析 ,其中 84 5 %的克隆均具有 1 0 0～ 6 0 0bp左右的插入片段 ,说明每一克隆中均含有特异性的目的片段 ,从而为大批量筛选、克隆DADS诱导人白血病细胞分化的相关未知新基因奠定了基础。结论　DADS能诱导人白血病HL 6 0细胞分化 ,并引起相关的基因发生改变 ,而抑制性消减杂交技术能有效地分离差异表达的基因。     

Effect of TCDD on Maternal Toxicity and Chorionic Gonadotropin——Bioactivity in the Immediate Post-implantation Period of Macaque

The pupose of this experiment was to observe the alterations in bioactivity of chorionic gonadotropin(CG) associated with early fetal loss(EFL).induced by the environmental toxin TCDD(1,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin) in the cynomolgus macaque.Ten of twelve females administered single doses of 1,2,or 4ug/kg TCDD on gestational day(GD) 12 had EFL from ten to twenty days later,Seven control animals treated only with the vehicle had normal pregnancies,Blood samples were repeatedly collected for hormone evaluation,from two days befor treatment to thirty-one days following treatment.Immunoreasctive monkey chorionic gonadotropin(mCG) was measured in serum using ELISA,and bioactive mCG was measured using a luminescence LH/CG bioassay.No change in immunoreactive mCG levels was detected as a result of TCDD,treatment,but bioactive mCG levels were significantly lower in TCDD-treated animals compared to controls.This change in bioactivity of mCG was also reflected in the ratio of mCG bioactivity to mCG immunoreactivity(B/I ratio) which began to rise in normal pregnancies by GD20,but did not rise in TCDD treated animals,These results demonstrate that normal pregnancy in the monkey,as in humans,is characterized by a post-implantation change in the B/I ratio of CG.These findings therefore suggest that changes in the production of bioactive CG may be used as a biomarker of environmental toxicant exposures which lead to EFL.     

北京协和医院食管恶生肿瘤的外科治疗

目的：探讨如何延长食管恶性肿瘤患者术后生存期。方法：回顾性分析１９６１￣１９９２年我院１０９８例食管恶性肿瘤患者的临床资料,并采用ＰＣＲ及ＲＴ－ＰＣＲ方法检测１９９６年３０例信管癌新鲜标本的抑癌出因脆性组氨酸三联体（ＦＨＩＴ）的缺失情况。结果：食管恶性肿瘤手术切除率不断提高,手术并发症和手术死亡率不断降低,但术后５年生存率无明显改变,延误诊断及非根治性切除影响了术后长期生存。ＦＨＩＴ基因的ｃＤＮＡ缺失在食管癌组织为６４．２％,在癌旁组织为２０％。结论：食管上皮高度不典型增生和ＦＨＩＴ基因在食管及其癌旁组织的缺失分别是早期食管癌诊断的病理学及分子生物学指标,后者也可作为食管癌切除范围的指标之一。早期诊断和治疗、根治性切除及术后营养支持对延长术后生存期十分重要。     

多种类型趋化性细胞因子在小鼠胸腺基质细胞系中的表达

目的分析趋化性细胞因子 SDF- 1α、 IP- 10、 KC、 MCP- 1和 RANTES在小鼠胸腺基质细胞系 MTEC1、 MTDC、 D2SC、 MTECB、 TEC 1C8、 TNC及原代培养胸腺基质细胞的半定量表达情况,并检测重组的趋化性细胞因子纯品 SDF- 1α、 IP- 10、 MCP- 1和 RANTES对小鼠胸腺细胞的趋化活性。方法以β- actin为内对照,用 RT- PCR方法,对上述 5种趋化性细胞因子进行 30个循环 PCR扩增,用凝胶成像系统观察扩增结果 ,并对各电泳带进行积分光密度扫描分析。用 Boyden小室法检测重组趋化性细胞因子 SDF- 1α、 IP- 10、 MCP- 1和 RANTES对全胸腺细胞的趋化活性,并计算其趋化指数。结果 SDF- 1α、 IP- 10、 KC、 MCP- 1和 RANTES在被检测胸腺基质细胞系的表达谱不同,表达强度亦有差异。 SDF- 1α和 MCP- 1在 D2SC和 TEC 1C8中未出现可见扩增条带;在 TEC 1C8中也未见 KC的扩增条带。重组趋化性细胞因子 SDF- 1α、 IP- 10、 MCP- 1和 RANTES对胸腺细胞的趋化指数分别为 3.7、 4.5、 6.2和 2.6。结论不同的胸腺基质细胞系,其趋化性细胞因子的表达谱和表达强度不同, 4种重组趋化性细胞因子对胸腺细胞表现出不同的趋化活性。     

雷公藤单体T4对IL—1刺激引起的类风湿患者关节滑膜成纤 …

目的 探讨雷公藤单体Ｔ４对经ＩＬ－１刺激的体外培养的类风湿关节炎（ＲＡ）患者的关节滑膜成纤维细胞增殖和产生ＩＬ－６的影响。方法 关节滑膜组织来自行关节置换术或滑膜切除术的类风湿患者。滑膜组织经体外消化使细胞分散后,传代培养,以培养３代后的滑膜成纤维细胞为对象,先给予ＩＬ－１刺激,再加入雷公藤Ｔ４单体。结果 Ｔ４可抑制由Ｉ－１刺激的滑膜成纤维增殖,但不影响ＩＬ－６的产生。结论 Ｔ４的上述作用可能是其